폴리아크릴아미드 겔 전기영동
겔 전기영동은 생물학 분야 전반에 걸쳐 실험실에서 사용되는 기본 기술로, DNA, RNA 및 단백질과 같은 거대분자를 분리할 수 있습니다.다양한 분리 매체와 메커니즘을 사용하면 물리적 특성을 활용하여 이러한 분자의 하위 집합을 보다 효과적으로 분리할 수 있습니다.특히 단백질의 경우 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)이 종종 선택되는 기술입니다.
PAGE는 전기영동 이동성, 즉 분석물질이 반대 전하의 전극을 향해 이동하는 능력을 바탕으로 단백질과 같은 거대분자를 분리하는 기술입니다.PAGE에서 이는 분자의 전하, 크기(분자량) 및 모양에 따라 결정됩니다.분석물질은 폴리아크릴아미드 겔에 형성된 기공을 통해 이동합니다.DNA 및 RNA와 달리 단백질은 포함된 아미노산에 따라 전하가 다르며 이는 단백질의 작동 방식에 영향을 미칠 수 있습니다.아미노산 끈은 겉보기 크기와 결과적으로 모공을 통해 이동할 수 있는 방법에 영향을 미치는 2차 구조를 형성할 수도 있습니다.따라서 보다 정확한 크기 추정이 필요한 경우 전기영동 전에 단백질을 변성시켜 선형화하는 것이 때때로 바람직할 수 있습니다.
SDS 페이지
나트륨-도데실 황산염 폴리아크릴아미드 겔 전기영동은 질량이 5~250kDa인 단백질 분자를 분리하는 데 사용되는 기술입니다.단백질은 분자량에 따라서만 분리됩니다.음이온성 계면활성제인 도데실황산나트륨은 단백질 샘플의 고유 전하를 가리고 유사한 전하 대 질량 비율을 제공하는 젤 제조에 첨가됩니다.간단히 말해서, 이는 단백질을 변성시키고 음전하를 부여합니다.
네이티브 페이지
Native PAGE는 단백질 분리를 위해 변성되지 않은 젤을 사용하는 기술입니다.SDS PAGE와 달리 젤 제조시 변성제가 첨가되지 않습니다.결과적으로 단백질의 분리는 단백질의 전하와 크기에 따라 이루어집니다.이 기술에서는 단백질의 형태, 접힘 및 아미노산 사슬이 분리에 영향을 미치는 요소입니다.이 과정에서 단백질은 손상되지 않으며, 분리가 완료된 후에도 회수가 가능합니다.
폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)은 어떻게 작동하나요?
PAGE의 기본 원리는 전류를 이용하여 폴리아크릴아미드 겔의 기공을 통과시켜 분석물을 분리하는 것입니다.이를 달성하기 위해 과황산암모늄(APS)을 첨가하여 아크릴아미드-비스아크릴아미드 혼합물을 중합합니다(폴리아크릴아미드).테트라메틸에틸렌디아민(TEMED)에 의해 촉매되는 반응은 분석물질이 이동할 수 있는 구멍이 있는 그물형 구조를 형성합니다(그림 2).젤에 포함된 총 아크릴아미드의 비율이 높을수록 기공 크기가 작아지고 통과할 수 있는 단백질도 작아집니다.아크릴아미드 대 비스아크릴아미드의 비율도 기공 크기에 영향을 주지만 이는 종종 일정하게 유지됩니다.기공 크기가 작을수록 작은 단백질이 젤을 통해 이동할 수 있는 속도가 감소하여 분해능이 향상되고 전류가 가해질 때 완충액으로 빠르게 흘러 들어가는 것을 방지할 수 있습니다.
폴리아크릴아미드 겔 전기영동용 장비
겔 전기영동 셀(탱크/챔버)
폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)용 겔 탱크는 아가로스 겔 탱크와 다릅니다.아가로스 겔 탱크는 수평이고 PAGE 탱크는 수직입니다.수직 전기영동 셀(탱크/챔버)에서는 두 개의 유리판 사이에 얇은 젤(보통 1.0mm 또는 1.5mm)을 붓고 한 챔버의 젤 바닥이 완충액에 잠기고 상단이 완충액에 잠기도록 장착합니다. 다른 방에서.전류가 가해지면 소량의 완충액이 겔을 통해 상단 챔버에서 하단 챔버로 이동합니다.어셈블리가 수직 위치를 유지하도록 보장하는 강력한 클램프를 갖춘 장비는 균일한 냉각으로 빠른 젤 실행을 촉진하여 뚜렷한 밴드를 생성합니다.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd.(Liuyi Biotechnology)는 다양한 크기의 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 세포(탱크/챔버)를 제조합니다.모델 DYCZ-20C 및 DYCZ-20G는 DNA 서열 분석을 위한 수직 전기영동 셀(탱크/챔버)입니다.수직 전기영동 셀(탱크/챔버) 중 일부는 DYCZ-24DN, DYCZ-25D 및 DYCZ-25E 모델과 같은 블로팅 시스템과 호환되며 Western Blotting 시스템 모델 DYCZ-40D, DYCZ-40G 및 DYCZ-40F와 호환됩니다. 이는 단백질 분자를 겔에서 막으로 옮기는 데 사용됩니다.SDS-PAGE 전기영동 후 Western Blotting은 단백질 혼합물에서 특정 단백질을 검출하는 기술입니다.실험 요구 사항에 따라 이러한 블로팅 시스템을 선택할 수 있습니다.
전기 영동 전원 공급 장치
젤을 작동시키기 위한 전기를 공급하려면 전기영동 전원 공급 장치가 필요합니다.Liuyi Biotechnology에서는 모든 응용 분야에 적합한 다양한 전기영동 전원 공급 장치를 제공합니다.매우 안정적인 전압 및 전류를 갖춘 모델 DYY-12 및 DYY-12C는 높은 전압 요구 사항 전기 영동을 충족할 수 있습니다.스탠드, 타이밍, VH, 단계별 적용 기능이 있습니다.이는 IEF 및 DNA 염기서열 분석 전기영동 응용 분야에 이상적입니다.일반적인 단백질 및 DNA 전기영동 응용을 위해 당사는 전기영동 셀(탱크/챔버)을 갖춘 인기 판매 전원 공급 장치인 DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 등의 모델을 보유하고 있습니다.이는 학교 실험실, 병원 실험실 등과 같은 중간 및 저전압 전기 영동 응용 분야에 사용할 수 있습니다.더 많은 전원 공급 장치 모델을 보려면 당사 웹사이트를 방문하세요.
Liuyi 브랜드는 중국에서 50년 이상의 역사를 가지고 있으며 회사는 전 세계에 안정적이고 고품질의 제품을 제공할 수 있습니다.수년간의 개발을 통해 귀하가 선택할 가치가 있습니다!
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폴리아크릴아미드 겔 전기영동이란 무엇입니까?
1. Karen Steward PhD 폴리아크릴아미드 겔 전기영동, 작동 원리, 기술 변형 및 응용
게시 시간: 2022년 5월 23일