폴리아크릴아미드 겔 전기영동
겔 전기영동은 생물학 분야 전반에 걸쳐 실험실에서 사용되는 기본 기술로, DNA, RNA 및 단백질과 같은 거대분자를 분리할 수 있습니다. 다양한 분리 매체와 메커니즘을 사용하면 물리적 특성을 활용하여 이러한 분자의 하위 집합을 보다 효과적으로 분리할 수 있습니다. 특히 단백질의 경우 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)이 종종 선택되는 기술입니다.
PAGE는 전기영동 이동성, 즉 분석물질이 반대 전하의 전극을 향해 이동하는 능력을 바탕으로 단백질과 같은 거대분자를 분리하는 기술입니다. PAGE에서 이는 분자의 전하, 크기(분자량) 및 모양에 따라 결정됩니다. 분석물질은 폴리아크릴아미드 겔에 형성된 기공을 통해 이동합니다. DNA 및 RNA와 달리 단백질은 포함된 아미노산에 따라 전하가 다르며 이는 단백질의 작동 방식에 영향을 미칠 수 있습니다. 아미노산 끈은 겉보기 크기와 결과적으로 모공을 통해 이동할 수 있는 방법에 영향을 미치는 2차 구조를 형성할 수도 있습니다. 따라서 보다 정확한 크기 추정이 필요한 경우 전기영동 전에 단백질을 변성시켜 선형화하는 것이 때때로 바람직할 수 있습니다.
SDS 페이지
나트륨-도데실 황산염 폴리아크릴아미드 겔 전기영동은 질량이 5~250kDa인 단백질 분자를 분리하는 데 사용되는 기술입니다. 단백질은 분자량에 따라서만 분리됩니다. 음이온성 계면활성제인 도데실황산나트륨은 단백질 샘플의 고유 전하를 가리고 유사한 전하 대 질량 비율을 제공하는 젤 제조에 첨가됩니다. 간단히 말해서, 이는 단백질을 변성시키고 음전하를 부여합니다.
네이티브 페이지
Native PAGE는 단백질 분리를 위해 변성되지 않은 젤을 사용하는 기술입니다. SDS PAGE와 달리 젤 제조시 변성제가 첨가되지 않습니다. 결과적으로 단백질의 분리는 단백질의 전하와 크기에 따라 이루어집니다. 이 기술에서는 단백질의 형태, 접힘 및 아미노산 사슬이 분리에 영향을 미치는 요소입니다. 이 과정에서 단백질은 손상되지 않으며, 분리가 완료된 후에도 회수가 가능합니다.
폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)은 어떻게 작동하나요?
PAGE의 기본 원리는 전류를 이용하여 폴리아크릴아미드 겔의 기공을 통과시켜 분석물을 분리하는 것입니다. 이를 달성하기 위해 과황산암모늄(APS)을 첨가하여 아크릴아미드-비스아크릴아미드 혼합물을 중합합니다(폴리아크릴아미드). 테트라메틸에틸렌디아민(TEMED)에 의해 촉매되는 반응은 분석물질이 이동할 수 있는 구멍이 있는 그물형 구조를 형성합니다(그림 2). 젤에 포함된 총 아크릴아미드의 비율이 높을수록 기공 크기가 작아지고 통과할 수 있는 단백질도 작아집니다. 아크릴아미드 대 비스아크릴아미드의 비율도 기공 크기에 영향을 주지만 이는 종종 일정하게 유지됩니다. 기공 크기가 작을수록 작은 단백질이 젤을 통해 이동할 수 있는 속도가 감소하여 분해능이 향상되고 전류가 가해질 때 완충액으로 빠르게 흘러 들어가는 것을 방지할 수 있습니다.
폴리아크릴아미드 겔 전기영동용 장비
겔 전기영동 셀(탱크/챔버)
폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)용 겔 탱크는 아가로스 겔 탱크와 다릅니다. 아가로스 겔 탱크는 수평이고 PAGE 탱크는 수직입니다. 수직 전기영동 셀(탱크/챔버)에서는 두 개의 유리판 사이에 얇은 젤(보통 1.0mm 또는 1.5mm)을 붓고 한 챔버의 젤 바닥이 완충액에 잠기고 상단이 완충액에 잠기도록 장착합니다. 다른 방에서. 전류가 가해지면 소량의 완충액이 겔을 통해 상단 챔버에서 하단 챔버로 이동합니다. 어셈블리가 수직 위치를 유지하도록 보장하는 강력한 클램프를 갖춘 장비는 균일한 냉각으로 빠른 젤 실행을 촉진하여 뚜렷한 밴드를 생성합니다.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd.(Liuyi Biotechnology)는 다양한 크기의 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 세포(탱크/챔버)를 제조합니다. 모델 DYCZ-20C 및 DYCZ-20G는 DNA 서열 분석을 위한 수직 전기영동 셀(탱크/챔버)입니다. 수직 전기영동 셀(탱크/챔버) 중 일부는 DYCZ-24DN, DYCZ-25D 및 DYCZ-25E 모델과 같은 블로팅 시스템과 호환되며 Western Blotting 시스템 모델 DYCZ-40D, DYCZ-40G 및 DYCZ-40F와 호환됩니다. 이는 단백질 분자를 겔에서 막으로 옮기는 데 사용됩니다. SDS-PAGE 전기영동 후 Western Blotting은 단백질 혼합물에서 특정 단백질을 검출하는 기술입니다. 실험 요구 사항에 따라 이러한 블로팅 시스템을 선택할 수 있습니다.
전기 영동 전원 공급 장치
젤을 작동시키기 위한 전기를 공급하려면 전기영동 전원 공급 장치가 필요합니다. Liuyi Biotechnology에서는 모든 응용 분야에 적합한 다양한 전기영동 전원 공급 장치를 제공합니다. 매우 안정적인 전압 및 전류를 갖춘 모델 DYY-12 및 DYY-12C는 높은 전압 요구 사항 전기 영동을 충족할 수 있습니다. 스탠드, 타이밍, VH, 단계별 적용 기능이 있습니다. 이는 IEF 및 DNA 염기서열 분석 전기영동 응용 분야에 이상적입니다. 일반적인 단백질 및 DNA 전기영동 응용을 위해 당사는 전기영동 셀(탱크/챔버)을 갖춘 인기 판매 전원 공급 장치인 DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 등의 모델을 보유하고 있습니다. 이는 학교 실험실, 병원 실험실 등과 같은 중간 및 저전압 전기 영동 응용 분야에 사용할 수 있습니다. 더 많은 전원 공급 장치 모델을 보려면 당사 웹사이트를 방문하세요.
Liuyi 브랜드는 중국에서 50년 이상의 역사를 가지고 있으며 회사는 전 세계에 안정적이고 고품질의 제품을 제공할 수 있습니다. 수년간의 개발을 통해 귀하가 선택할 가치가 있습니다!
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폴리아크릴아미드 겔 전기영동이란 무엇입니까?
1. Karen Steward PhD 폴리아크릴아미드 겔 전기영동, 작동 원리, 기술 변형 및 응용
게시 시간: 2022년 5월 23일