Comet Assay(단일 세포 겔 전기영동, SCGE)는 개별 세포의 DNA 손상을 감지하고 복구하는 데 주로 사용되는 민감하고 빠른 기술입니다. "Comet Assay"라는 이름은 결과에 나타나는 특징적인 혜성 같은 모양에서 유래되었습니다. 세포의 핵이 "머리"를 형성하고 손상된 DNA 조각이 이동하여 혜성과 유사한 "꼬리"를 만듭니다.
원칙
Comet 분석의 원리는 전기장에서 DNA 조각의 이동을 기반으로 합니다. 손상되지 않은 DNA는 세포핵 내에 남아 있는 반면, 손상되거나 조각난 DNA는 양극 쪽으로 이동하여 혜성의 "꼬리"를 형성합니다. 꼬리의 길이와 강도는 DNA 손상 정도에 정비례합니다.
절차
- 세포 준비: 시험할 세포를 저융점 아가로스와 혼합한 후 현미경 슬라이드 위에 펼쳐 균일한 층을 형성합니다.
- 세포 용해: 슬라이드를 용해액에 담가서 세포막과 핵막을 제거하고 DNA를 노출시킵니다.
- 전기영동: 슬라이드를 알칼리성 또는 중성 조건의 전기영동 챔버에 넣습니다. 손상된 DNA 조각은 전기장의 영향으로 양극 쪽으로 이동합니다.
- 더럽히는 것: 전기영동 후 형광염료(예: ethidium bromide)로 슬라이드를 염색하여 DNA를 시각화합니다.
- 현미경 분석: 형광현미경이나 전문 소프트웨어를 이용하여 혜성의 형태를 분석하고, 꼬리 길이, 강도 등의 매개변수를 측정합니다.
바이오렌더의 이미지
데이터 분석
Comet 분석의 결과는 다음과 같은 몇 가지 주요 매개변수를 기반으로 평가됩니다.
- 꼬리 길이: DNA가 이동하는 거리를 나타내며, DNA 손상 정도를 나타냅니다.
- 꼬리 DNA 함량: 꼬리로 이동하는 DNA의 비율로, DNA 손상을 정량적으로 측정하는 데 자주 사용됩니다.
- 올리브 테일 모멘트(OTM): 꼬리 길이와 꼬리 DNA 함량을 결합하여 DNA 손상에 대한 보다 포괄적인 측정을 제공합니다.
응용
- 유전독성 연구: Comet Assay는 화학물질, 약물, 방사선이 세포 DNA에 미치는 영향을 평가하는 데 널리 사용되며 유전독성 테스트의 핵심 도구입니다.
- 환경 독성학: 환경오염물질이 유기체의 DNA에 미치는 영향을 분석하여 생태계 안전성에 대한 통찰력을 제공합니다.
- 의료 및 임상 연구: Comet Assay는 DNA 복구 메커니즘, 암 및 기타 DNA 관련 질병을 연구하는 데 사용됩니다. 또한 방사선 요법 및 화학 요법과 같은 암 치료법이 DNA에 미치는 영향을 평가합니다.
- 식품 및 농업 과학: 농약, 식품 첨가물 및 기타 물질의 안전성을 평가하고 동물 모델에서 독성 영향을 연구하는 데 사용됩니다.
장점
- 고감도: 낮은 수준의 DNA 손상도 검출 가능합니다.
- 간단한 조작: 기술이 간단하여 고처리량 스크리닝에 적합합니다.
- 폭넓은 적용: 동물세포, 식물세포 등 다양한 세포 종류에 적용 가능합니다.
- 정량화 문제: DNA 손상에 대한 정성적 데이터를 제공하는 반면 정량적 분석은 소프트웨어 및 이미지 분석 기술에 크게 의존합니다.
- 실험 조건: 결과는 전기영동 시간, pH 등의 요인에 의해 영향을 받을 수 있으므로 실험 조건을 신중하게 제어해야 합니다.
제한 사항
Comet Assay는 DNA 손상 및 복구를 감지하는 유연성과 높은 감도로 인해 생물 의학 연구, 환경 과학 및 약물 개발에서 매우 귀중한 도구입니다. 북경유이생명공학유한회사 (Liuyi Biotechnology)혜성 분석을 위한 수평 전기영동 챔버를 제공합니다. 대해 논의하기 위해 우리와 연락을 환영합니다혜성 분석규약.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd(Liuyi Biotechnology)는 자체 전문 기술팀과 R&D 센터를 통해 50년 이상 전기영동 기기 제조를 전문으로 해왔습니다. 우리는 설계부터 검사, 창고, 마케팅 지원까지 신뢰할 수 있고 완벽한 생산 라인을 보유하고 있습니다. 당사의 주요 제품은 전기영동 셀(탱크/챔버), 전기영동 전원 공급 장치, 청색 LED 투과조명기, UV 투과조명기, 젤 이미지 및 분석 시스템 등입니다. 또한 실험실용 PCR 장비, 볼텍스 믹서 및 원심분리기와 같은 실험실 장비도 공급합니다.
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게시 시간: 2024년 9월 20일