반건식 트랜스 블롯 장치 DYCP-40C의 작동 단계

DYCP-40C 반건식 블로팅 시스템은 폴리아크릴아미드 겔의 단백질을 니트로셀룰로오스 멤브레인, 나일론 멤브레인 및 PVDF 멤브레인과 같은 멤브레인으로 옮기기 위해 전기 영동 전원 공급 장치와 함께 사용됩니다. 반건식 블로팅은 수평 구성의 흑연 판 전극을 사용하여 수행되며, 이온 저장소 역할을 하는 완충액에 담근 여과지 시트 사이에 젤과 막을 끼웁니다. 전기영동 이동 중에 음전하를 띤 분자는 겔 밖으로 이동하여 양극 쪽으로 이동하여 막에 침전됩니다. 겔과 여과지 스택으로만 분리된 플레이트 전극은 겔 전체에 높은 전계 강도(V/cm)를 제공하여 매우 효율적이고 빠른 전달을 수행합니다. 더 작은 DYCP – 40C 전기영동 셀의 전사 표면은 150 × 150(mm)이며, DYCZ-24DN 및 DYCZ-24EN 전기영동 셀의 겔을 포함하여 표준 젤을 전사하는 데 적합합니다.

이 반건식 트랜스 블롯 장치의 작동에 대해 자세히 알아 보겠습니다.

DYCP-40C 작동을 위한 재료, 기구
전기영동 전원 공급 장치 DYY-6C, 반건식 트랜스 블롯 장치 DYCP-40C, 완충액 및 완충액용 용기. 등.

작업 단계
1. 유리판과 함께 젤을 transfer buffer 용액에 넣습니다.

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2. 젤 크기 측정

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3.젤 크기에 따라 여과지 3장을 준비합니다. 여과지 크기는 젤 크기보다 약간 커야 합니다. 여기서는 Whatman 여과지를 사용합니다.

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4.여과지 3장을 완충액에 천천히 넣고 여과지를 완충액에 완전히 담그고 기포가 생기지 않도록 합니다.

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5.겔과 여과지의 크기에 따라 니트로셀룰로오스 막을 준비하고 절단하는 단계; 니트로셀룰로오스 막의 크기는 겔과 여과지의 크기보다 커야 합니다.

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6.니트로셀룰로오스 막을 완충 용액에 넣으십시오.

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7.3개의 여과지를 꺼내어 멤브레인에서 완충 용액이 떨어지지 않을 때까지 추가 완충 용액을 떨어뜨립니다. 그런 다음 여과지를 DYCP-40C 바닥에 놓습니다.

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8.유리판에서 젤을 꺼내어 스태킹 젤을 부드럽게 청소하고 젤을 완충 용액에 넣습니다.

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9.젤을 여과지에 놓고 젤의 한쪽 끝부터 시작하여 기포를 피하십시오.

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10.적절한 도구를 사용하여 젤과 여과지 사이의 기포를 제거하십시오.

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11.젤 쪽의 거친 쪽을 젤 쪽으로 니트로셀룰로오스 막을 덮습니다. 그런 다음 적절한 도구를 사용하여 멤브레인과 젤 사이의 기포를 제거하십시오. 멤브레인 위에 여과지 3장을 올려 놓습니다. 여과지와 멤브레인 사이의 기포를 제거하려면 적절한 도구를 사용해야 합니다.

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12.뚜껑을 덮고 전기영동 실행 매개변수를 정전류 80mA로 설정합니다.

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13.전기영동이 완료되었습니다. 우리는 다음과 같은 결과를 얻습니다.

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게시 시간: 2023년 4월 4일