소개
겔 전기영동은 분자 생물학의 기본 기술로, 단백질, 핵산 및 기타 거대분자를 분리하는 데 널리 사용됩니다. 정확하고 재현 가능한 결과를 얻으려면 시료량, 전압 및 전기영동 시간을 적절하게 제어하는 것이 중요합니다.우리 연구실 동료가 제안하는 것SDS-PAGE 겔 전기영동 중 이러한 매개변수를 관리하기 위한 모범 사례.
Beijing Liuyi Biotechnology 겔 전기영동 제품
샘플량: 일관성 보장
SDS-PAGE 전기영동을 수행할 때 시료량은 결과의 분해능에 큰 영향을 미칠 수 있는 핵심 요소입니다. 일반적으로 웰당 총 단백질 10μL를 로드하는 것이 좋습니다. 일관성을 보장하고 인접한 웰 사이의 샘플 확산을 방지하려면 빈 웰에 동일한 부피의 1x 로딩 버퍼를 로드하는 것이 중요합니다. 이러한 예방 조치는 웰이 비어 있는 경우 발생할 수 있는 샘플이 인접한 레인으로 퍼지는 것을 방지하는 데 도움이 됩니다.
샘플을 로드하기 전에 항상 하나의 웰에 분자량 마커를 추가하는 것부터 시작하십시오. 이를 통해 전기영동 후 단백질 크기를 쉽게 식별할 수 있습니다.
전압 제어: 속도와 분해능의 균형
전기영동 중에 인가되는 전압은 샘플이 겔을 통해 이동하는 속도와 분리 분해능 모두에 직접적인 영향을 미칩니다. SDS-PAGE의 경우 80V 정도의 낮은 전압으로 시작하는 것이 좋습니다. 이러한 초기 저전압으로 인해 샘플이 천천히 균일하게 이동하여 분리 젤에 들어갈 때 날카로운 밴드에 집중됩니다.
샘플이 분리 젤에 완전히 들어가면 전압을 120V로 높일 수 있습니다. 이렇게 높은 전압은 이동을 가속화하여 단백질이 분자량에 따라 효율적으로 분리되도록 합니다. 전기영동이 완료되었음을 나타내는 브로모페놀 블루 염료 전면의 진행 상황을 모니터링하는 것이 필수적입니다. 농도가 10~12%인 젤의 경우 일반적으로 80~90분이면 충분합니다. 그러나 15% 젤의 경우 실행 시간을 약간 연장해야 할 수도 있습니다.
시간 관리: 언제 멈춰야 할지 알기
타이밍은 겔 전기영동의 또 다른 중요한 요소입니다. 너무 길거나 너무 짧은 기간 동안 젤을 실행하면 최적이 아닌 분리가 발생할 수 있습니다. 브로모페놀 블루 염료의 이동은 유용한 지표입니다. 염료가 젤 바닥에 도달하면 일반적으로 실행을 중지해야 합니다. 10~12%와 같은 표준 젤의 경우 일반적으로 약 80~90분의 전기영동 기간이 적합합니다. 15%와 같이 더 높은 비율의 겔의 경우 단백질의 완전한 분리를 보장하기 위해 실행 시간을 연장해야 합니다.
버퍼 관리: 버퍼 재사용 및 준비
전기영동 완충액은 실험실의 특정 조건에 따라 1~2회 재사용할 수 있습니다. 그러나 최적의 결과를 위해서는 새로운 10x 버퍼를 준비하고 사용 직전에 희석하는 것이 좋습니다. 이렇게 하면 완충액의 효율성이 유지되어 더욱 신뢰할 수 있는 전기영동 결과를 얻을 수 있습니다.
Beijing Liuyi Biotechnology 겔 전기영동 제품
시료량, 전압 및 전기영동 시간을 주의 깊게 제어하면 겔 전기영동 결과의 정확성과 재현성을 크게 향상시킬 수 있습니다. 실험실 작업에서 이러한 모범 사례를 구현하면 더 명확하고 뚜렷한 밴드를 달성하여 다운스트림 분석을 위한 더 나은 데이터를 얻는 데 도움이 됩니다.
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Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd(Liuyi Biotechnology)는 자체 전문 기술팀과 R&D 센터를 통해 50년 이상 전기영동 기기 제조를 전문으로 해왔습니다. 우리는 설계부터 검사, 창고, 마케팅 지원까지 신뢰할 수 있고 완벽한 생산 라인을 보유하고 있습니다. 당사의 주요 제품은 전기영동 셀(탱크/챔버), 전기영동 전원 공급 장치, 청색 LED 투과조명기, UV 투과조명기, 젤 이미지 및 분석 시스템 등입니다. 또한 실험실용 PCR 장비, 볼텍스 믹서 및 원심분리기와 같은 실험실 장비도 공급합니다.
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게시 시간: 2024년 8월 20일