겔 전기영동은 DNA 분석을 위해 분자생물학에서 사용되는 주요 방법 중 하나입니다. 이 방법은 DNA 조각을 젤을 통해 이동시켜 크기나 모양에 따라 분리하는 방법입니다. 그런데 전기영동 실험 중에 아가로스 젤에 밴드가 번지거나 젤에 밴드가 없는 등의 오류가 발생한 적이 있습니까? 이러한 오류의 원인은 무엇입니까?
당사 기술자는 귀하가 참조할 수 있도록 여기에 몇 가지 문제 해결 방법을 요약했습니다.
1. 아가로스겔에 밴드가 번짐
●DNA가 분해되었습니다. 뉴클레아제 오염을 피하십시오.
● 전기영동 버퍼가 신선하지 않습니다. 전기영동 완충액을 반복 사용하면 이온강도가 감소하고 pH값이 증가하여 완충능력이 약해지며 이는 전기영동 효과에 영향을 미칩니다. 전기영동 버퍼는 자주 교체하는 것이 좋습니다.
● 부적절한 전기영동 조건을 사용했습니다. 전압이 20V/cm를 초과하지 않도록 하고 전기 영동 중에 온도를 30°C 미만으로 유지하십시오. 거대 DNA 가닥 전기영동의 경우 온도는 15°C 미만이어야 합니다. 전기영동 완충액의 완충 용량이 충분한지 확인하십시오.
● 젤에 DNA가 너무 많이 로드되었습니다. DNA의 양을 줄이세요.
● DNA에 염분이 너무 많습니다. 에탄올 침전을 사용하여 과잉 염분을 사전에 제거합니다.
● DNA가 단백질로 오염되었습니다. 페놀추출을 이용하여 단백질을 미리 제거해 보세요.
● DNA가 변성되었습니다. 전기영동 전에 가열하지 마십시오. 20mM NaCl로 완충액에 DNA를 희석합니다.
2. 이상 DNA 밴드 이동
● λHind III 단편의 COS 부위의 재생성. 전기영동 전 DNA를 65°C에서 5분간 가열한 후 얼음 위에서 5분간 냉각합니다.
● 부적절한 전기영동 조건을 사용했습니다. 전압이 20V/cm를 초과하지 않도록 하고 전기 영동 중에 온도를 30°C 미만으로 유지하십시오. 전기영동 버퍼의 버퍼 용량이 충분한지 확인하세요.
● DNA가 변성되었습니다. 전기영동 전에 가열하지 마십시오. 20mM NaCl로 완충액에 DNA를 희석합니다.
3. 아가로스 겔에 DNA 밴드가 희미하거나 없음
● 젤에 로딩된 DNA의 양이나 농도가 부족했습니다. DNA의 양을 늘리십시오. 폴리아크릴아미드 겔 전기영동은 아가로스 전기영동보다 약간 더 민감하며 샘플 로딩을 적절하게 줄일 수 있습니다.
● DNA가 분해되었습니다. 뉴클레아제 오염을 피하십시오.
● DNA는 젤에서 전기영동되었습니다. 더 짧은 시간 동안 젤을 전기영동하거나, 더 낮은 전압을 사용하거나, 더 높은 비율의 젤을 사용하십시오.
● 에티디움 브로마이드(ethidium bromide)로 염색된 DNA의 시각화를 위해 부적절한 W 광원이 사용되었습니다. 감도를 높이려면 단파장(254nm) W 조명을 사용하세요.
4. DNA 밴드가 없어짐
●작은 크기의 DNA를 젤에서 전기영동했습니다. 더 짧은 시간 동안 젤을 전기영동하거나, 더 낮은 전압을 사용하거나, 더 높은 비율의 젤을 사용하십시오.
● 유사한 분자의 DNA 밴드를 구별하기가 어렵습니다. 전기영동 시간을 늘려 농도를 확인해보세요젤을 사용하여 젤의 비율이 올바른지 확인하세요.
● DNA가 변성되었습니다. 전기영동 전에 가열하지 마십시오. 20mM NaCl로 완충액에 DNA를 희석합니다.
● DNA 가닥이 커서 기존의 겔 전기영동은 적합하지 않습니다. 펄스 겔 전기영동을 분석합니다.아가로스 겔 전기영동과 관련하여 어떤 다른 문제가 있었나요? 앞으로 가이드에 대해 더 많이 연구하겠습니다.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd(Liuyi Biotech)는 중국에서 전기영동 관련 제품에 주력하는 전문 회사입니다. 이야기는 중국이 아직 개혁개방 시대에 진입하지 않았던 1970년부터 시작됩니다. 수년간의 개발을 통해 Liuyi Bitotech은 국내 전기 영동 제품 시장에서 Liuyi 브랜드로 알려진 자체 브랜드를 보유하고 있습니다.
Liuyi 브랜드는 중국에서 50년 이상의 역사를 가지고 있으며 회사는 전 세계에 안정적이고 고품질의 제품을 제공할 수 있습니다. 수년간의 개발을 통해 귀하가 선택할 가치가 있습니다!
Liuyi Biotech의 수평 전기영동 셀(탱크/챔버)은 품질이 좋고 외관도 좋습니다. 다양한 크기의 젤 트레이를 사용하면 다양한 실험 요구 사항을 충족할 수 있습니다. 우리는 자체 기술 팀과 공장을 보유하고 있습니다. 설계부터 제조, 원자재, 핵심 부품까지 전체 프로세스를 제어할 수 있습니다. DYCP 31 시리즈는 DNA 전기영동용 모델입니다.DYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, 그리고DYCP-31E. 차이점은 젤 크기와 가격입니다. 우리는 고객에게 전체 크기의 제품을 제공합니다. 모델DYCP-32C가장 큰 젤을 250mm*250mm로 만들 수 있습니다.
한편, 우리는 전기 영동 전원 공급 장치를 권장합니다DYY-6C,DYY-6D그리고DYY-10C당사 전기영동 셀(탱크/챔버) DYCP-31 및 32 시리즈용.
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게시 시간: 2022년 5월 9일